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9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細胞

,9LlacZ

貨號：YJ-r037（種屬鑒定）

價格： 1500.0

規(guī)格： 1*10 ⁶

細胞介紹

9L/lacZ細胞株1989年從9L細胞株（大鼠硝基脲誘導(dǎo)的膠質(zhì)瘤細胞株）發(fā)展而來。 用攜帶E. coli編碼beta-半乳糖苷酶lacZ基因和帶來G418抗性的Tn5新霉素基因BAG復(fù)制缺陷的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體感染9L細胞株。 細胞在G418存在下培養(yǎng)14天，克隆，并檢測beta-半乳糖苷酶生成。 9L/lacZ產(chǎn)生高水平的酶，選擇其進行后續(xù)研究。 細胞持續(xù)表達lacZ報告基因產(chǎn)物，從E. coli衍生來的beta-半乳糖苷酶，從而可以通過組織切片的組織化學(xué)染色來鑒定單個腫瘤細胞。 同一片子上的淋巴細胞和其它響應(yīng)細胞也可以通過雙標(biāo)記抗體進行鑒定。 染色細胞和背景的對比有益于圖像分析。 這是少數(shù)允許量化分析的大腦微觀腫瘤模型中的一種。 這種腫瘤模仿了人類大腦腫瘤的生長和傳播的重要特性。 beta-半乳糖苷酶的表達十分穩(wěn)定，但細胞培養(yǎng)數(shù)月后應(yīng)該重新進行克隆。

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1) 準(zhǔn)備：1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基(推薦：YJ-0002)，優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %，P/S 1 %

2) 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二．細胞處理：

1） 凍存細胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

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